甲胎蛋白_甲胎蛋白异质体_铁蛋白和肿瘤相关因子联合检测在原发性肝癌诊断中的价值

【临床检验】

甲胎蛋白、甲胎蛋白异质体、铁蛋白和肿瘤相关因子联合检测在原发性肝癌诊断中的价值许成新，褚邦勇，徐玖飞，林黎

*

(温州医学院附属恩泽医疗中心集团浙江省台州医院，浙江台州317000)

［摘要］目的:探讨甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体(AFP－L3)、铁蛋白(Fer)和肿瘤相关因子(TSGF)联合检测对原

60例良性肝病组和60例健康人群的AFP、AFP－发性肝癌(PHC)早期诊断的临床价值。方法:对80例原发性肝癌组、

L3、Fer和TSGF分别采用化学发光微粒子免疫分析法、亲和吸附法、微粒子酶促化学发光法以及酶联免疫吸附法检测其

AFP－L3、Fer和TSGF单个肿癌标志物诊断原发性肝癌的敏感性分别为87．5%、85．0%、90．9%、含量。结果:AFP、

88．8%，97．0%、86．5%、85．3%;四种肿瘤标志物联合检测在PHC诊断中的敏感性和特异性分别特异性分别为94．8%、

AFP－L3、Fer和TSGF联为98．9%和99．8%，联合检测的敏感性与单项检测有统计学意义(P＜0．01)。结论:应用AFP、

合检测可大大提高原发性肝癌的检出率。［关键词］甲胎蛋白;甲胎蛋白异质体;铁蛋白;肿瘤相关因子;原发性肝癌;肿瘤相关物质［［［中图分类号］R730．43文献标识码］B文章编号］1004－8685(2012)02－0308－03

DiagnosticvalueofAFP，AFP－L3，FerandTSGFinprimarylivercancer

XUCheng－xin，CHUBang－yong，XUJiu－fei，LINLi*

(TaizhouHospitalofZhejiangProvince，Taizhou317000，China)

［Abstract］Objective:ToexploretheclinicaldiagnosticvalueofAFP，AFP－L3，FerandTSGFinprimarylivercancer(PHC)．Methods:TwohundredcasesweredividedintoPHCgroup(n=80)andBenignliverdiseasegroup(n=60)andnormalcontrolgroup(n=60)，corpusculechemiluminescenceimmunoassaymethod，affinityabsorption，corpusculeenzymicreactionchemiluminescencemethodandEnzyme－linkedimmunosorbentassaywereusedtodetectserumAFP，AFP－L3，FerandTSGFofthesethreegroups．Results:Insinglemarkerdiagnosis，thesensibilitiesofAFP，AFP－L3，FerandTSGFforPHCwere

85．0%，90．9%and88．8%respectively，whilethespecificitiesofthemwere94．8%，97．0%，86．5%，85．3%．The87．5%，

sensibilityandspecificityofcombineddiagnosisofthesefourtumormarkerswere98．9%and99．8%respectively．Thereweresignificantdifferencesbetweensinglediagnosisandcombineddiagnosisinthesensibility(P＜0．01)．Conclusion:Combineddi-agnosisofAFP，AFP－L3，FerandTSGFcanremarkablyimprovethedetectionrateofprimaryhepatocellularcarcinoma．［Keywords］Alpha－fetoprotein(AFP);AFP－L3;Ferritin(Fer);Tumorspecificgrowthfactor(TSGF);Primaryhepato-cellularcarcinoma;Tumorrelatedsubstances

研究背景与目的:原发性肝癌(primaryhepatocellularcarci-noma，PHC)是世界上流行最高的十种恶性肿瘤之一，流行病学资料已证实肝癌的发生是多因素协同作用的结果，但原发性肝癌的实验室早期诊断指标相对比较复杂，单一的检测指标已不能满足，联合检测显得尤为重要。原发性肝癌是指自肝细胞或肝内胆管细胞发生的癌症，本病可以发生于任何年龄，以40岁～49岁为最多。男女之比为2～5∶1。原发性肝癌

1/50为胆管细胞肝癌。原发性肝癌是约4/5为肝细胞肝癌，

肝细胞或肝内胆管细胞发生的癌种，是我国常见的恶性肿瘤之一，早期发现及早期治疗是提高疗效的关键。在诊断原发性肝癌的血清指标中，主要依赖甲胚蛋白(alpha－fetoprotein，AFP)含量的测定。由于10%的肝癌不产生AFP，30%的肝癌

［作者简介］许成新(1978－)，男，学士，主管技师，主要从事临

床免疫学方面研究。

*通讯联系人，E－mail:shxy818@163．com

因此常规的产生的AFP量很少，致AFP呈阴性或低浓度，

AFP检测已不能从真正意义上去预测肝癌的发生;甲胎蛋白异质体(AFP－L3)是美国FDA批准的新一代肝癌生物学标志物，是肝癌细胞的特异甲胎蛋白，对肝癌的诊断具有很高的诊

［2］

断价值，是比单独AFP更为特异的肝癌预警指标和确诊指

Fer)含量比正常人高，标，在肝癌患者血清中铁蛋白(ferritin，

已经受到了临床诊断的关注，而且Fer和甲胎蛋白有着很密切的关系，血清Fer被称为原发性肝癌的第二血清学标志物，特别是对AFP阴性患者。原发性肝癌患者血清Fer往往显著升高，其确切原因尚不明。肿瘤相关因子(tumorspecificgrowth

TSGF)是原发性肝癌的灵敏检测指标。为了提高原发factor，

AFP－L3、Fer和性肝癌的检出率，减少误诊和漏诊。AFP、

TSGF联合检测，可提高肝癌诊断的阳性率，综合评价各项指标对原发性肝癌的诊断价值及联合检测的临床意义。

［1］

中国卫生检验杂志2012年2月第22卷第2期ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology，Feb2012;Vol22

No2309

1材料与方法

1．1诊断标准和实验室资料

检测对象共200例，男性157例，女性43例。其中，原发性肝癌组80例，男63例，女17例，平均年龄(47．17±5．27)岁。良性肝病组30例，男36例，女24例，平均年龄(50．02±9．05)岁。正常对照组60例，男35例，女25例，平均年龄(46．21±5．27)岁。所有病例均经实验室检查(包括病理切

片)、B超、CT、MRI、血管造影，肝穿刺活检及手术后病理等确诊。标本均取自治疗前，空腹静脉采血。三组检查对象在年

龄和性别方面统计无明显差异，P＞0．05，有统计学意义。

1．2仪器

仪器采用美国雅培公司生产的发光检测系统Architecti2000、贝克曼公司生产的UniCelDxI800发光检测系统;美国伯乐公司生产的680酶标仪以及湘仪生产的离心机。1．3试剂

甲胎蛋白(AFP)采用仪器配套公司所产的体外诊断试剂;甲胎蛋白异质体(AFP－L3)试剂盒由北京热景生物技术有限公司提供，其中AFP－L3%=AFP②×2．5/AFP×100%;铁蛋白(Fer)试剂盒由贝克曼公司提供;肿瘤相关因子(TSGF)试剂盒由上海江莱生物科技有限公司提供。1．4方法

AFP是基于化学发光微粒子免疫分析(CMIA)检测技术

的全自动免疫分析系统，

AFP－L3是用微量离心柱利用亲和吸附法分离检测小扁豆凝集素结合型AFP_L3的百分含量、Fer是根据微粒子酶促化学发光，以金刚烷AMPPD为标记底物的全自动化学发光免疫分析系统和TSGF根据试剂盒说明书操作测定，记录结果并按临床明确诊断进行分析。1．5肿瘤检测标准

AFP＞20ng/ml为阳性;AFP－L3%＞10%为阳性;血清铁蛋白＞150ng/ml为阳性;TSGF＞95U/ml为阳性，所有指标

阳性均参照相关文献和国际标准为准［3］

。1．6统计分析

使用Spss18．0统计学软件分析Excel数据库，t检验分析计量数据，数据以均数±标准差(x±s)表示。χ2

检验分析计数数据，数据采用率表示。P＜0．05为具有统计学意义。2结果

2．1所有患者甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体(AFP－L3)、铁蛋白(Fer)和肿瘤相关因子(TSGF)比较检测结果如表1，AFP、AFP－L3、Fer和TSGF检测结果比较，原发性肝癌组明显

高于另外两组，P＜0．01，说明有统计学意义，而良性肝病组

AFP、AFP－L3、Fer和TSGF检测值与健康组有差异，P＜0．05，说明有统计学意义。

表1所有患者甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体(AFP－L3)、铁蛋白(Fer)和肿瘤相关因子(TSGF)测定结果比较(x±s)组别例数AFP(μg/L)AFP－L3(%)Fer(μg/L)TSGF(U/ml)原发性肝癌组80246．0±19．935．9±3．129．8±9．8281．9±103．0良性肝病组6065．1．0±46．48．51±2．03259．3±155．599．7±50．5健康组6011．9±7．97．518±3．49130．4±114．854．3±41．02．2

联合诊断各组指标比较

三组患者进行AFP、AFP－L3、铁蛋白(Fer)和TSGF检测

以及联合检测的阳性率比较(见表2)，表明联合检测阳性率明

显高于单一指标检测，P＜0．01，说明有统计学意义。

表2

四个检测指标的阳性率统计(例，%)组别例数AFPAFP－L3FerTSGF联合原发性肝癌组8070(87．5)68(85．0)70(86．9)48(80．8)60(98．9)良性肝病组6051(85．0)2(3．3)9(14．8)3(10．0)2(6．7)健康组600(0)0(0)2(3．88)1(2．5)0(0)2．3

敏感性和特异性比较

联合检测的敏感性和特异性比单独检测有显著统计学意义(P＜0．01)，AFP－L3和TSGF的特异性之间有统计学意义(P＜0．05)之外，其他单项检测之间的敏感性和特异性无统计学意义(P＞0．05)。

表3

原发性肝癌组单项和四项联合检测的敏感性、

特异性和准确性比较(%，例)

组别敏感性特异性AFP

87．5(80)

94．8(80)AFP－L385．0(80)97．0(80)Fer90．9(80)86．5(80)TSGF

88．8(80)84．3(80)AFP+AFP－L3+TSGF

98．9(80)

99．8(80)

3

讨论

原发性肝癌(PHC)是临床常见的一种恶性肿瘤。肝癌早期不易发现，晚期的治疗效果较差，死亡率很高。这就对肝癌

的诊治提出了很高的要求［4］

。要做到早发现，早诊断，早治疗，诊断就成为关键的步骤。甲胎蛋白诊断肝癌的价值已经

得到了广泛的认可，但是仍然还会造成诊断的遗漏［5］

。PHC在男女之间的发病率有明显差别。本组研究组中的80例原

发性肝癌患者中，男女之比为3．7∶1，与相关报道一致［6］

。随着现在检测技术的迅猛发展，有针对性的肿瘤标志物检测提高了检测的准确率，为肿瘤早期诊断提供了更多值得参考的标准，但是单一的检测指标不能完全的提高诊断率，存在着漏诊和不能确诊的情况，筛选出特征性的肿瘤标志物检测，成为有助于肿瘤诊断的有力证据，是临床诊断研究的重点和难点。

联合检查已经成为PHC有效的诊疗方法，对于血清甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体(AFP－L3)、铁蛋白(Fer)和肿瘤相关因子(TSGF)联合检测应用于肝癌患者的诊断报道很少。

AFP肿瘤标志物已经得到了公认，是重要的诊断指标，AFP－L3是肝癌特异性的甲胎蛋白，也已经是作为筛查肝癌的重要指标，铁蛋白(Fer)在肝癌患者体内异常的高浓度，有报道称其为继甲胎蛋白以后的第二个具有价值的肝癌肿瘤标

记物。因此本文筛选出血清AFP、

AFP－L3、Fer和TSGF这四个指标进行联合诊断。AFP是原发性肝细胞癌的一个重要标

志物［7］

，AFP－L3是肝癌特异性的甲胎蛋白，也已经是作为筛

查肝癌的重要指标，血清Fer在肝脏合成且含量最多，当肝脏发生疾病或肿瘤时，肝细胞受损或破坏，就会释放大量Fer，本

组资料中PHC患者的Fer明显增高，

Fer的阳性率为86．9%。原发性肝癌在发生发展过程中有多种癌基因被激活，使肿瘤相关因子持续表达，肿瘤细胞不断通过内在性自分泌调节，不受机体控制，呈持续性增殖状态。

TSGF是数种国际公认的恶性肿瘤生长相关的糖类物质和代谢物的统称，是恶性肿瘤内及周边毛细血管大量扩增的

物质基础，

该因子随恶性肿瘤的形成和增长逐渐释放到外周(下转第311页)

中国卫生检验杂志2012年2月第22卷第2期ChineseJournalofHealthLaboratoryTechnology，Feb2012;Vol22表1

未成年与成年患者UUDNA检测结果比较

男9．09(1/11)5．97

27．58(329/1193)4．48±1．441．87，0．17

女31．51(23/73)5．71±1．1455．10(2238/4062)5．00±1．5216．10，6．00E－52．21，0．027

χ2，PNo2311

分组未成年人成年人χ2，P

t，P

阳性率%28．57(24/84)48．87(2569/5257)13．，0．00022

x±s5．72±1．114．69±1．42

t，P2．35，0．12279．48，9．76E－63

2．79，0．0053

3．54，0．0004

3

讨论

［3］

解脲支原体是一种致病性比较弱的条件致病病原体，未成年人感染UU多为非性传播的途径，新生儿由母亲生殖道

［4］

分娩时感染，也可能因与成年UU感染阳性父母或家人的密切接触而获得感染，因被感染途径隐匿而容易被忽略，从而导致进一步的并发症状。

本文统计结果显示未成年患者UUDNA感染率极显著低

2

P=0．00022)，而UUDNA载量则显于成年患者(χ=13．，

P=0．0004)，著高于成年患者(t=3．54，提示未成年人UU感而成年人则以慢性迁延性感染多见。染多以急性感染为主，

在男性患者中，未成年患者和成年患者感染阳性率无统计学

2

P=0．17)，差异(χ=1．87，可能与男性未成年患者例数较少

有关，也不宜参与载量的比较。而在女性患者中，未成年患者

2

P=6．00E－5)，感染阳性率显著低于成年患者(χ=16．10，但

UUDNA载量则高于成年女性患者(t=2．21，P=0．027)，提示

因致病性比较解脲支原体感染可使新生儿发育异常，

弱的特点可能引起未成年患者慢性迁延性感染，因此对未成年患者的感染研究不容忽视，弄清未成年患者UU感染特性对其感染的流行病学研究具有一定的价值。［参考文献］

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(收稿日期:2011－09－09)

［5］

因未成年感染途径特殊从而导致感染病例少见但以症状较重

的急性感染多见。未成年患者男女两性间感染阳性率无统计

2

P=0．12)，可能提示未成年人通过生活密学差异(χ=2．35，

切接触而非性传播途径感染的危险性是相同的。而成年患者

2

P=9．76E－则表现为女性感染率显著高于男性(χ=279．48，

P=0．0053)，63)，女性UUDNA载量也高于男性(t=2．79，提

示成年女性因生理结构的易感性比男性更易感染UU，且急性感染比例也高于男性。

(上接第309页)

TSGF就可以达到检出浓度。因此，血中，在恶性肿瘤的早期，

TSGF不仅是恶性肿瘤的特异性标志，而且对早期诊断具有重要价值。其显著特点是对恶性肿瘤的检测兼有早期性和广谱性，是与其他常见肿瘤标志物不相关的物质，是一种新型肿瘤标志物，因此它对多种恶性肿瘤的诊断起到一定的作［8］

部分自身免疫性疾用。TSGF检测虽可受到急性炎性反应、

病的干扰，导致假阳性的出现，但可通过跟踪复检进行排［9］

AFP－L3、Fer和TSGF单个肿癌标除。本研究结果显AFP、

85．0%、志物诊断原发性肝癌的敏感性分别为87．5%、

90．9%、82．8%，97．0%、86．5、88．3%;特异性分别为94．8%、

四种种肿瘤标志物联合检测在PHC诊断中的敏感性和特异性分别为98．9%和99．8%，且差异具有统计学意义。证实单一检测虽然具有较高的敏感性，但是其明显存在着自身缺陷，AFP、AFP－L3、Fer和TSGF联合检测能明显提高原发性肝癌诊断的灵敏性，可弥补单项检测之不足，有助肝癌的临床筛选，而且在评判疗效和转归等方面可能有较好的应用价值。

AFP、AFP－L3、Fer和TSGF单独检测本文原发性肝癌组，

AFP和TSGF联合搞特异性的AFP－L3后检敏感性都不够高，

测的阳性率明显高于良性肝病组和健康对照组，显示联合检测对原发性肝癌具有一定的诊断价值，作为原发性肝癌诊断的可信赖指标，可提高原发性肝癌的检出率，其阳性率可达

98．9%，四项项标志物相互补充，相互印证，从而提高原发性

肝癌的检出率，对早期诊断和治疗均有重要的临床意义。［参考文献］

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(收稿日期:2011－06－28)